PCR實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域,，例如:艾滋病檢測，乙型肝炎,，禽疫病,，癌基因的檢測和診斷，DNA指紋,，個(gè)體識別,，親子鑒定及法醫(yī)物證等等，今天為大家進(jìn)行詳解PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的基本原則,。

　　一,、PCR實(shí)驗(yàn)室布局設(shè)計(jì)

　　PCR實(shí)驗(yàn)室原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū)，樣品制備區(qū),，擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域,，并設(shè)有專用走廊，各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間,，工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置,。不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔獨(dú)立的，各工作區(qū)有明顯的標(biāo)志,，不能直通,，如果緊密連接，需安裝物品傳遞窗,。前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū),，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)，即從:試劑準(zhǔn)備區(qū)一樣品制備區(qū)一PCR擴(kuò)增室一產(chǎn)物分析室,，不得逆向流動(dòng),。實(shí)驗(yàn)室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，不得逆向流動(dòng),。各工作區(qū)頂部應(yīng)該安裝紫外燈,，紫外燈波長為254mm，每20m一支40W的紫外燈,。

　　二,、實(shí)驗(yàn)室功能區(qū)設(shè)計(jì)及主要設(shè)備

　　1.試劑準(zhǔn)備區(qū):主要進(jìn)行試劑的制備,，分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑盒用于樣品制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)域,。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。本區(qū)主要設(shè)備有天平,，冰箱,，離心機(jī),，加樣器,，振蕩器等。對于氣流壓力的控制,，本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求,，一般為+10Pa。

　　2.樣品制備區(qū):主要進(jìn)行樣品的保存,，核酸提取,，貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定DNA的合成。本區(qū)主要設(shè)備有冰箱,，生物安全柜,，離心機(jī)，加樣器,，振蕩器等,。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎海员苊鈴泥徑鼌^(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染,，一般為+10Pa.

　　3.擴(kuò)增區(qū):主要進(jìn)行DNA擴(kuò)增,。此外，已制備的DNA模板(來.自樣品制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行,。本區(qū)主要設(shè)備有:擴(kuò)增儀,，冰箱，離心機(jī),，加樣器等,。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免氣溶從本區(qū)漏出一般為一25Pa,。

　　4.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū):擴(kuò)增產(chǎn)物的測定,。本區(qū)主要設(shè)備有酶標(biāo)儀，洗板機(jī),、加樣器和水浴箱等,。本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，一般為一25Pa,，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域,。

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